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艾滋病检测技术——PCR技术

更新时间:2016-01-16 15:33 文章来源:上海九龙男子医院 http://www.com5200.com/ 文章作者:上海男科医院

     人体感染艾滋病后,其症状是十分复杂的。艾滋病症状,应该从艾滋病在临床上的四个分期来分别考量。

 
    从感染艾滋病病毒到发病,有一个完整的自然过程,一般来说,从感染到发病需要2~10年。临床上将这个过程分为四期:急性感染期、潜伏期、艾滋病前期、典型艾滋病期。
 
艾滋病检测技术
 
    1、急性感染期
 
    大部分病人在艾滋病急性感染期,没有任何症状。但有一部分病人在感染数天至3个月后,有如流感或传染性单核xibao增多等症状:发热、寒战、关节疼、肌肉痛、呕吐、腹泻、喉痛等。一般在艾滋病毒感染后2至8周出皮疹,血中出现艾滋病毒抗体。此阶段出现的症状,一般可持续3-14日,以后自然消失。
 
    2、无症状感染期/潜伏期
 
    临床上没有任何症状,但人体内有艾滋病毒,因此又称为艾滋病潜伏期。但血清中能检出HIV以及HIV核心和包膜蛋白的抗体。此阶段具有传染性,一般可持续2~10年或更长。8年内约有50%的人发展为艾滋病。有报告称,1至7年内从感染病毒到发病,其比例依次为1.5%、5%、10%、15%、25%、30%和40%。儿童艾滋病潜伏期短,平均为12个月。艾滋病潜伏期用敏感方法可检测艾滋病感染者的病毒载量,可预测5年内发病的机率。
 
    3、艾滋病前期
 
    无症状感染期之后,人体出现明显的与艾滋病有关的症状和体征,被称之为艾滋病相关综合征,也有人称之为持续性全身淋巴结肿大综合征。主要表现为持续性的淋巴腺肿大,开始于颈部,其次为腋、腹股沟淋巴结等。一般至少有两处以上淋巴结肿大。特点是淋巴结肿大直径在1cm以上,质地柔韧,无压痛,无黏连,能自由活动,一般持续肿大3个月以上。此外还可能有:体重减轻10%以上,持续数月的周期性发热(38摄氏度左右),夜间盗汗,发生单纯疱疹病毒、白色念珠菌(属真菌类)等各种感染。
 
    4、典型艾滋病期
 
    由于免疫系统被严重破坏,各种致命性机会感染、肿瘤等极易发生。病变可表面在肺、口腔、消化系统、神经系统、内分泌系统、心脏、肾脏、眼、关节、皮肤等等。已发生机会性感染者,平均存活期为9个月。
 
    艾滋病检测,是指采用实验室方法对人体血液、其他体液、组织器官、血液衍生物等进行艾滋病病毒、艾滋病病毒抗体及相关免疫指标检测,包括监测、检验检疫、自愿咨询检测、临床诊断、血液及血液制品筛查工作中的艾滋病检测。PCR可用来追踪HIV的自然感染史。可在其它血清学和病毒学标志出现前检测病毒序列,这样可判定无症状而且血清阴性患者潜在的HIV的传播性。
 
    PCR技术在HIV检测中的应用
 
    PCR可用来追踪HIV的自然感染史。可在其它血清学和病毒学标志出现前检测病毒序列,这样可判定无症状而且血清阴性患者潜在的HIV的传播性;可用来监测长潜伏期(4~7年)病人,以及在抗病毒治疗期间病毒的水平;也可用于HIV-1血清阳性母亲的婴儿的HIV检测。在婴儿出生后较初的6~9个月期间,他们的血液中存在母体的抗体,因此用PCR可判定婴儿是否真正被HIV感染。
 
    1.血清抗体阴性病人的HIV序列的检测
 
    由于在感染HIV后到出现免疫反应之前有一段滞后期,这个血清学阴性的滞后期通常长达6周至6个月,而且无抗体产生期可能更长些。在此期间受感染者往往检测不到抗体,因此,血清阴性的人也可能已感染HIV.PCR法在高危人群中检测到HIV-1比由血清学转阳确诊的时间可以提高6个月。对少数初次共培养呈阴性的人,甚至可在血清转阳之前24~39个月就能确诊为HIV-1感染。对血清学试验结果不能确定者,也可通过PCR作进一步分析和确诊。
 
    2.血清抗体阳性病人HIV序列的检测
 
    从血清阳性的HIV感染者的外周血单核xibao中可检测出前病毒序列。通过共培养分离出病毒的血清阳性的同性恋男人血液制备的DNA,用PCR可100%检出病毒序列;用血清阴性共培养阴性同性恋者的标本,经PCR扩增检出病毒序列者为64%,血清阴性正常人标本PCR检测也为阴性,表明未出现假阳性结果。由于HIV-1基因组的广泛的异源性,为提高检测的阳性率可采用多种引物(如LTR,gag和env基因的引物)。利用PCR法从313份已证实为抗体阳性的标本中检测出310份HIV阳性(99%)。
 
    有人从AIDS或ARC病人的外周血单核xibao培养物,精液xibao和精液上清制备DNA。然后用PCR法和逆转录酶测定法分别检测HIV-1。PCR扩增产物与32P标记的探针退火之后用BstNI消化。再进行聚丙烯酰胺凝胶电泳和自显影。结果表明,在逆转录酶阴性的28个xibao系中有9个以及用逆转录酶法不能确定的9个xibao系中有2个为阳性。这说明过去许多xibao培养物认为是阴性者,实际上用更敏感的PCR测定时则为阳性。
 
    PCR技术检测HIV-DNA序列对AIDS和ARC的确诊起着重要作用。但也有人认为 对已知HIV抗体、抗原或培养阳性的病人不必再做PCR。较合适的PCR检测对象是那些疑有HIV感染但又缺乏确切的血清学依据的人群,如上述的HIV阳性母亲所生的婴儿,阳性患者的性伴侣,静脉吸毒者和可疑的血清反应者。PCR技术还可用来检测血液制品及疫苗中有无HIV。
 
    温馨提示:艾滋病检测收费有效按照卫生局规定标准收费,具体检测费用,医院内价格公示栏都有公布,你可以放心就诊。

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